Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 9 trang
Dung lượng: 192 KB

Giới thiệu nội dung

Characterization of a Cry1Ac-receptor alkaline phosphatase in susceptible and resistant Heliothis virescens larvae

Tác giả: Juan L. Jurat-Fuentes and Michael J. Adang

Lĩnh vực: Entomology and Biochemistry and Molecular Biology

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này tập trung vào việc xác định vai trò của một glycoprotein 68-kDa trong ruột giữa của ấu trùng sâu bướm thuốc lá (Heliothis virescens) trong mối liên hệ với sự kháng thuốc Cry1Ac. Kết quả cho thấy glycoprotein này là một dạng phosphatase kiềm gắn trên màng, được đặt tên là HvALP. Sự gắn kết của HvALP với các oligosaccharide N-liên kết có chứa N-acetylgalactosamine đầu cuối là yếu tố cần thiết cho sự gắn kết của Cry1Ac. Giảm số lượng HvALP trong màng viền ruột của ấu trùng kháng thuốc đã được chứng minh là nguyên nhân dẫn đến giảm sự gắn kết của soybean agglutinin và sự kháng thuốc Cry1Ac. Nghiên cứu này nhấn mạnh vai trò của HvALP như một thụ thể gắn kết Cry1Ac và đề xuất rằng mức độ HvALP giảm là một yếu tố quan trọng trong cơ chế kháng thuốc Cry1Ac ở H. virescens.

Mục lục chi tiết:

  • Introduction
  • Materials and methods
  • Insect strains and brush border membrane vesicle (BBMV) preparation
  • Cry1Ac toxin purification and labeling
  • Quantification of alkaline phosphatase and aminopeptidase activities
  • Ligand, lectin and immunoblots of BBMV proteins
  • Digestion of BBMV proteins with peptide-N-glycosidase F
  • Detection of GPI anchors
  • Detection of alkaline phosphatase activity in SDS/PAGE gels and blots
  • Results
  • Identification of the 68-kDa BBMV glycoprotein as alkaline phosphatase
  • Characterization of the glycan moiety of HvALP by lectin blotting
  • Importance of ALP glycosylation for Cry1Ac binding
  • Reduced HvALP correlates with resistance to Cry1Ac
  • Discussion
  • Acknowledgements
  • References