Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 10 trang
Dung lượng: 305 KB

Giới thiệu nội dung

Calcium-independent cytoskeleton disassembly induced by BAPTA

Tác giả: Yasmina Saoudi, Bernard Rousseau, Jacques Doussière, Sophie Charrasse, Cécile Gauthier-Rouvière, Nathalie Morin, Christelle Sautet-Laugier, Eric Denarier, Robin Scaïfe, Charles Mioskowski, Didier Job

Lĩnh vực: Sinh học tế bào, Hóa sinh

Nội dung tài liệu:
Nghiên cứu này khám phá khả năng của BAPTA, một chất tạo phức canxi, trong việc gây ra sự phân rã của bộ xương tế bào (cytoskeleton) một cách độc lập với hoạt tính tạo phức canxi của nó. Các thí nghiệm cho thấy BAPTA có khả năng làm giảm hoặc phân rã cả actin và vi ống (microtubules) trong nhiều loại tế bào. Điều thú vị là một dẫn xuất của BAPTA, D-BAPTA, với khả năng tạo phức canxi giảm mạnh, cũng thể hiện hoạt tính phân rã bộ xương tế bào tương tự. Điều này cho thấy rằng tác động phân rã bộ xương tế bào của BAPTA không phụ thuộc vào khả năng liên kết canxi của nó. Ngoài ra, BAPTA còn ảnh hưởng đến mức ATP và chức năng ty thể, nhưng những tác động này cũng không giải thích được hiệu quả phân rã bộ xương tế bào. Nghiên cứu đề xuất việc sử dụng D-BAPTA như một đối chứng trong các thí nghiệm tín hiệu canxi để loại trừ các tác động độc lập với canxi của BAPTA.

Mục lục chi tiết:

  • Calcium-independent cytoskeleton disassembly induced by BAPTA
  • Keywords: actin; BAPTA; calcium; cytoskeleton; microtubules.
  • Calcium ions are essential second messengers in eukaryotic cells.
  • Correspondence to D. Job, INSERM U366, DRDC/CS, 17 rue des Martyrs 38054 Grenoble Cedex 9, France.
  • Abbreviations: BAPTA, 1,2-bis(2-aminophenoxy)ethane-N,N,N’,N’-tetraacetic acid; BAPTA AM, BAPTA acetoxymethyl ester; DBB, 5,5′-dibromo BAPTA; DMB, 5,5′-diméthyl BAPTA; FCCP, carbonyl cyanide 4-(trifluoromethoxy)phenyl-hydrazone.
  • D-BAPTA AM, a BAPTA derivative lacking one acetic acid group was prepared by chemical synthesis (CEA Saclay, France).
  • Cell culture
  • Calcium imaging
  • Microinjection
  • Immunofluorescence staining and confocal microscopy
  • ATP determination in cell extracts
  • Mitochondria preparation and respiration
  • Results
  • BAPTA is a potent cytoskeleton-depolymerizing agent
  • Fig. 1. BAPTA action on the cytoskeleton.
  • BAPTA effects in the presence of other cytoskeleton drugs
  • Fig. 2. Effects of BAPTA in the presence of other cytoskeleton drugs.
  • BAPTA effects on the cytoskeleton are independent of calcium chelation
  • Fig. 3. Effects of BAPTA on the cytoskeleton are independent of calcium chelation.
  • BAPTA affects ATP levels and mitochondrial function
  • Fig. 4. BAPTA and its derivatives affect ATP pools.
  • Table 1. Effect of BAPTA (0.5 µmol·mg⁻¹) on mitochondrial respiration.
  • BAPTA effect on mitochondrial localization and distribution
  • Fig. 5. Effects of BAPTA on mitochondrial distribution and shape.
  • BAPTA and small GTPases
  • BAPTA AM and formaldehyde
  • Discussion
  • Acknowledgements
  • References