Báo cáo khoa học: Investigation of the contribution of histidine 119 to the conduction of protons through human Nox2

Investigation of the contribution of histidine 119 to the conduction of protons through human Nox2

Tác giả: Tosti J. Mankelow, X. Wen Hu, Kate Adams, Lydia M. Henderson

Lĩnh vực: Department of Biochemistry, School of Medical Sciences, University of Bristol, UK

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này khám phá vai trò của histidine 119 (His119) trong việc dẫn truyền proton qua protein Nox2 của con người. Các thí nghiệm đã tạo ra các dòng tế bào CHO biểu hiện các dạng đột biến khác nhau của Nox2. Kết quả cho thấy rằng, ngoài histidine 115 (His115), histidine 119 cũng đóng vai trò cần thiết cho quá trình dẫn truyền proton qua Nox2. Các đột biến ở các vị trí histidine này, đặc biệt là sự vắng mặt của His119, đã làm giảm đáng kể dòng proton được kích hoạt bởi axit arachidonic. Tuy nhiên, vai trò của histidine 111 (His111) trong quá trình này chưa thể xác định rõ ràng do mức độ biểu hiện protein thấp hơn.

Mục lục chi tiết:

• Introduction
• Materials and methods
• Sequence alignment
• Mutagenesis of His111, 115 and/or 119 to Leu in full-length Nox2
• Construction and maintenance of transfected CHO cell lines
• Expression of the mutant Nox2 proteins
• Transmembrane proton flux in mutant CHO91 cell lines
• The predicted third transmembrane helix for Nox2
• Results
• Expression of Nox2 histidine mutations in CHO cells
• Arachidonic acid activated proton conduction
• Mutation of individual histidine residues in human Nox2
• Discussion
• Acknowledgements
• References