Báo cáo khoa học: Investigations of the supercoil-selective DNA binding of wild type p53 suggest a novel mechanism for controlling p53 function

InvestigAtions Of The Supercoil-Selective DNA Binding Of Wild Type P53 Suggest A Novel Mechanism For Controlling P53 Function

Tác giả: Miroslav Fojta, Hana Pivonkova, Marie Brazdova, Katerina Nemcova, Jan Palecek, Borivoj Vojtesek

Lĩnh vực: Sinh hóa, Sinh học phân tử

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này khám phá cơ chế liên kết DNA chọn lọc với cấu trúc xoắn kép của protein ức chế khối u p53. Các thí nghiệm sử dụng protein p53 tái tổ hợp, các kháng thể đơn dòng và các dạng DNA khác nhau (xoắn kép, thẳng, vòng đã thư giãn) để làm sáng tỏ vai trò của miền lõi (core domain – CD) và miền liên kết DNA đầu cuối C (C-terminal DNA-binding site – CTDBS) trong tương tác này. Kết quả cho thấy CTDBS đóng vai trò quan trọng trong khả năng liên kết chọn lọc với DNA xoắn kép, trong khi CD đảm nhận việc liên kết DNA không chọn lọc khi CTDBS bị chặn. Nghiên cứu cũng đề xuất rằng sự thay đổi cấu trúc không gian của DNA có thể là một phần của các cơ chế điều hòa phức tạp, kiểm soát sự chuyển đổi giữa trạng thái không hoạt động và hoạt động của p53.

Mục lục chi tiết:

• Introduction
• Materials and methods
• DNA samples
• Monoclonal antibodies
• Results
• Effects of monoclonal antibodies on binding of reduced and oxidized p53 to scDNA
• Influence of mAbs on the supercoil-selective DNA binding of reduced p53
• Effects of p53 oxidation on SCS binding
• Competition between supercoiled DNA and p53CON for p53
• Discussion
• Redox and antibody modulation of DNA binding of p53 core and C-terminal domains
• The p53 CTDBS is critical for preferential binding of full length p53 to scDNA
• Supercoil-nonselective DNA binding of the full length p53 complex with Bp53-10.1 is located within the protein core domain
• Is the core domain involved in the SCS DNA binding of unmodified full length p53?
• Possible consequences of the p53 SCS DNA binding in the regulation of p53 biological activities
• Acknowledgements
• References