Báo cáo khoa học: Trigger factor interacts with the signal peptide of nascent Tat substrates but does not play a critical role in Tat-mediated export

Trigger Factor Interacts with the Signal Peptide of Nascent Tat Substrates but Does Not Play a Critical Role in Tat-Mediated Export

Tác giả: Wouter S. P. Jong, Corinne M. ten Hagen-Jongman, Pierre Genevaux, Josef Brunner, Bauke Oudega, and Joen Luirink

Lĩnh vực: Vi Sinh học Phân tử

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này sử dụng phương pháp liên kết chéo bằng ảnh để điều tra sự tương tác của peptide tín hiệu của các protein Tat đang được tổng hợp. Kết quả cho thấy peptide tín hiệu của các protein Tat mới được tổng hợp có sự tiếp xúc chặt chẽ với yếu tố phiên mã (TF) và các thành phần ribosome như L23 và L29. Sự tương tác này diễn ra sớm trong quá trình sinh tổng hợp và kéo dài cho đến khi chuỗi protein hoàn chỉnh. Tuy nhiên, khi loại bỏ hoặc biểu hiện quá mức TF, hiệu quả và động học của quá trình xuất protein qua con đường Tat ít bị ảnh hưởng đáng kể. Điều này cho thấy TF không đóng vai trò quan trọng trong việc xuất protein qua con đường Tat.

Mục lục chi tiết:

• Trigger factor interacts with the signal peptide of nascent Tat substrates but does not play a critical role in Tat-mediated export
• Experimental procedures
• Strains, plasmids and media
• Reagents and sera
• Table 1. Bacterial strains and plasmids used in this study.
• Plasmid construction
• In vitro transcription, translation and crosslinking
• Pulse-chase analysis
• Sample analysis
• Results
• The TorA signal peptide is close to trigger factor early in biogenesis
• Fig. 1. Photo-crosslinking to the signal peptide of nascent TorA/P2.
• The SufI signal peptide is in close proximity to TF, L23 and L29 early in biogenesis
• Fig. 2. Photo-crosslinking to the signal peptide of nascent SufI.
• The Sufl signal peptide is close to TF until late in translation
• Fig. 3. Photo-crosslinking of TF to the signal peptide of nascent SufI chains of various lengths.
• TF is dispensable for the export of SufI in vivo
• Fig. 4. In vivo analysis of SufI export in Atig, AdnaKdnaJ and Atig AdnaKdnaJ mutants.
• Fig. 5. In vivo analysis of SufI upon overexpression of TF.
• Discussion
• Acknowledgements
• References