Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 11 trang
Dung lượng: 272 KB

Giới thiệu nội dung

Total Chemical Synthesis and NMR Characterization of the Glycopeptide tx5a, a Heavily Post-Translationally Modified Conotoxin, Reveals That the Glycan Structure is α-D-Gal-(1→3)-α-D-GalNAc

Tác giả: James Kang, William Low, Thomas Norberg, Jill Meisenhelder, Karin Hansson, Johan Stenflo, Guo-Ping Zhou, Julita Imperial, Baldomero M. Olivera, Alan C. Rigby, and A. Grey Craig

Lĩnh vực: Hóa sinh, Sinh học phân tử

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này trình bày quá trình tổng hợp hóa học và đặc tính hóa bằng phổ NMR của glycopeptide tx5a, một conotoxin phức tạp với nhiều biến đổi sau dịch mã. Glycopeptide này, được phân lập từ nọc độc của ốc biển Conus textile, gây ra tình trạng tăng động và co giật ở chuột khi tiêm vào não. Phân tích cho thấy tx5a chứa chín gốc amino acid được biến đổi, bao gồm cysteine, γ-carboxyglutamic acid, 6-bromotryptophan và 4-trans-hydroxyproline. Một đặc điểm nổi bật là sự hiện diện của một gốc threonine được glycosyl hóa. Mặc dù các nghiên cứu trước đây đã xác định glycan này là một disaccharide gồm N-acetylgalactosamine (GalNAc) và galactose (Gal), cấu trúc liên kết giữa các gốc đường này vẫn chưa được xác định rõ. Bài báo này tập trung vào việc làm sáng tỏ cấu trúc liên kết của glycan trên tx5a, đối chiếu với giả thuyết ban đầu về cấu trúc T-antigen, và cung cấp bằng chứng xác thực về cấu trúc liên kết α-D-Gal-(1→3)-α-D-GalNAc thông qua các phương pháp tổng hợp hóa học, sắc ký, và phổ NMR. Kết quả nghiên cứu nhấn mạnh sự phức tạp của quá trình O-glycosyl hóa trong các peptide của ốc biển Conus.

Mục lục chi tiết:

  • Total chemical synthesis and NMR characterization of the glycopeptide tx5a, a heavily post-translationally modified conotoxin, reveals that the glycan structure is α-D-Gal-(1→3)-α-D-GalNAc
  • Experimental procedures
  • Peptide synthesis
  • Disulfide bond formation
  • HPLC purification of cyclo tx5a
  • Enzyme hydrolysis
  • Chemical reduction
  • Coelution
  • Mass spectrometry
  • Purification of native tx5a
  • NMR spectroscopy
  • Results
  • Discussion
  • References