Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 13 trang
Dung lượng: 203 KB

Giới thiệu nội dung

A Novel Cholesterol-Based Detergent

Tác giả: Katja Gehrig-Burger, Ladislav Kohout, Gerald Gimpl

Lĩnh vực: Hóa sinh, Hóa hữu cơ

Nội dung tài liệu:
Nghiên cứu này mô tả việc thiết kế, tổng hợp và đặc tính hóa CHAPSTEROL, một chất tẩy rửa mới dựa trên cholesterol, được phát triển để hòa tan chức năng các protein màng phụ thuộc cholesterol. CHAPSTEROL được thử nghiệm với thụ thể oxytocin, một thụ thể kết hợp G yêu cầu cholesterol để có trạng thái gắn kết ái lực cao. Kết quả cho thấy CHAPSTEROL làm phong phú các protein liên kết cholesterol, trong khi các chất tẩy rửa khác như CHAPSO làm giảm đáng kể các protein này. Hơn nữa, CHAPSTEROL duy trì sự định vị của caveolin, cholesterol và sphingomyelin trong các vi miền lipid (lipid rafts), cho thấy nó là một chất tẩy rửa phù hợp để hòa tan các protein màng phụ thuộc cholesterol và phân lập các vi miền lipid.

Mục lục chi tiết:

  1. Giới thiệu
  2. Thiết kế và tổng hợp CHAPSTEROL
  3. Xác định nồng độ micelle tới hạn (CMC) của CHAPSTEROL
  4. Hòa tan thụ thể oxytocin người
  5. Đánh dấu ái lực quang bằng một chất tương tự cholesterol được kích hoạt bằng quang được đánh dấu tritium
  6. Phân lập và đặc tính hóa các vi miền màng không hòa tan bằng chất tẩy rửa sử dụng CHAPSTEROL, CHAPS và Triton X-100
  7. Thảo luận
  8. Thủ tục thực nghiệm
  9. Vật liệu
  10. Tổng hợp CHAPSTEROL
  11. Tổng hợp [³H]photocholesterol
  12. Xác định nồng độ micelle tới hạn
  13. Chuẩn bị các phức hợp bao gồm steroid-methyl β-cyclodextrin
  14. Nuôi cấy tế bào
  15. Chuẩn bị màng
  16. Hòa tan
  17. Kết tủa và xác định protein
  18. Phân tích liên kết thụ thể
  19. Đánh dấu ái lực quang protein bằng [³H]photocholesterol
  20. Phân lập các vi miền màng không hòa tan bằng chất tẩy rửa mật độ thấp
  21. Western blotting
  22. Phân tích lipid
  23. Thống kê
  24. Lời cảm ơn
  25. Tài liệu tham khảo