Báo cáo khoa học: Identification and characterization of novel PKA holoenzymes in human T lymphocytes

Identification and characterization of novel PKA holoenzymes in human T lymphocytes

Tác giả: Sigurd Ørstavik, Ane Funderud, Tilahun Tolesa Hafte, Sissel Eikvar, Tore Jahnsen and Bjørn Steen Skålhegg

Lĩnh vực: Khoa học y sinh

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này tập trung vào việc nhận diện và đặc tính hóa các phức hợp enzyme Protein Kinase A (PKA) mới trong tế bào lympho T ở người. PKA là một holoenzyme bao gồm các tiểu đơn vị điều hòa (R) và tiểu đơn vị xúc tác (C). Các nhà nghiên cứu đã xác định sự biểu hiện của hai tiểu đơn vị xúc tác PKA mới là Cal (40 kDa) và Cβ2 (47 kDa) trong các tế bào lympho T. Kết quả cho thấy cả hai tiểu đơn vị Cal và Cβ2 đều liên kết với các tiểu đơn vị điều hòa RIa và RIIa để tạo thành các holoenzyme PKAI và PKAII. Đặc biệt, nghiên cứu còn phát hiện Cal và Cβ2 có thể cùng tồn tại trong cùng một holoenzyme, tạo ra các enzyme mới đáp ứng với cAMP và có khả năng điều hòa các hiệu ứng cụ thể của cAMP.

Mục lục chi tiết:

• Introduction
• Keywords
• Correspondence
• Abstract
• Abbreviations
• Results and Discussion
• Figure 1. Identification of PKA catalytic subunits in human T cells.
• Figure 2. The human Cβ2 cDNA encodes an active protein kinase and the Cβ2 peptide antibody is specific for human Cβ2.
• Figure 3. Cβ2 colocalizes and associates with both Rla and Rlla to form PKAI and PKAII in T cells.
• Figure 4. Colocalization of CBẞ2 and Ca1 on the same PKA holoenzyme.
• Experimental procedures
• Antibodies
• Purification of T cells
• Construction of expression vectors and culture and transfection of 293T cells
• Lysis of cells, immunoprecipitation, immunoblotting and PKA enzymatic assay
• Indirect immunofluorescence
• Acknowledgements
• References