Báo cáo khoa học: Determinants of the nucleocytoplasmic shuttling of muscle glycogen synthase

Determinants of the Nucleocytoplasmic Shuttling of Muscle Glycogen Synthase

Tác giả: Emili Cid, Daniel Cifuentes, Susanna Baqué, Juan C. Ferrer, Joan J. Guinovart

Lĩnh vực: Biochemistry, Molecular Biology

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này khám phá cơ chế phân tử và các yếu tố quyết định sự vận chuyển nucleocytoplasmic của enzyme tổng hợp glycogen cơ (MGS). Kết quả cho thấy MGS tích tụ trong nhân tế bào khi thiếu glucose và dự trữ glycogen thấp. Sự tích tụ này tương quan nghịch với hàm lượng glycogen trong tế bào. Các thí nghiệm chỉ ra rằng một vùng giàu arginine ở C-terminal của protein, liên quan đến sự hoạt hóa allosteric bởi Glc6P, đóng vai trò quan trọng trong việc tập trung và kết tụ MGS ở nhân. Ngược lại, các vị trí phosphoryl hóa điều chỉnh hoạt tính của MGS dường như không ảnh hưởng đến sự phân bố dưới tế bào của nó. Quan sát MGS đồng hiện diện với các protein nhân khác và sự thay đổi phân bố dưới nhân khi ức chế phiên mã gợi ý rằng MGS có thể tham gia vào các quá trình nhân ngoài chức năng trao đổi chất của nó.

Mục lục chi tiết:

• Nucleocytoplasmic translocation of muscle glycogen synthase
• Results
• MGS is translocated between the nucleus and cytoplasm
• HsMGS is exported from the nucleus to the cytoplasm via the CRM1/exportin pathway
• Sequence determinants of the HsMGS nucleocytoplasmic transport
• The phosphorylation sites that regulate HsMGS activity are not involved in the control of its subcellular distribution
• The region involved in Glc6P allosteric regulation is crucial for the nuclear accumulation of HsMGS
• What is the role of nuclear MGS?
• Experimental procedures
• Plasmid and adenovirus construction
• Cell culture and transfection
• GS activity assays and glycogen content
• Immunocytochemistry and antibodies
• Confocal microscopy and time-lapse microscopy
• Acknowledgements
• References
• Supplementary material