Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 14 trang
Dung lượng: 590 KB

Giới thiệu nội dung

Critical Roles Of Leu99 And Leu115 At The Heme Distal Side In Auto-oxidation And The Redox Potential Of A Heme-Regulated Phosphodiesterase From Escherichia Coli

Tên đề tài: Critical Roles of Leu99 and Leu115 at the Heme Distal Side in Auto-oxidation and the Redox Potential of a Heme-Regulated Phosphodiesterase from Escherichia coli

Tác giả: Nao Yokota, Yasuyuki Araki, Hirofumi Kurokawa, Osamu Ito, Jotaro Igarashi and Toru Shimizu

Lĩnh vực: Hóa sinh, Sinh học phân tử

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này tập trung vào vai trò của các gốc Leu99 và Leu115, nằm ở phía xa của heme và tạo thành một túi kỵ nước, đối với các đặc tính hóa lý của heme iron trong enzyme Ec DosH. Enzyme này là một enzyme cảm biến dựa trên heme, có hoạt tính khi heme ở trạng thái khử (Fe(II)) và bất hoạt khi ở trạng thái oxy hóa (Fe(III)). Nghiên cứu đã tạo ra các protein đột biến L99T, L99F, L115T và L115F để đánh giá ảnh hưởng của chúng đến tốc độ tự oxy hóa, động học liên kết O2 và CO, cũng như tiềm năng oxy hóa khử của heme iron. Kết quả cho thấy các đột biến này làm thay đổi đáng kể tốc độ tự oxy hóa và tiềm năng oxy hóa khử, nhưng ít ảnh hưởng đến động học liên kết O2 và CO. Điều này gợi ý rằng Leu99 và Leu115 đóng vai trò quan trọng trong việc xác định trạng thái điện tử của heme iron, thay vì ảnh hưởng đến cấu trúc kênh tiếp cận phối tử.

Mục lục chi tiết:

  • Summary
  • Experimental procedures
  • Materials
  • Construction of the expression plasmids for Ec DosH and Ec DosH mutants
  • Preparation of Ec DosH
  • Optical absorption spectra
  • Stopped-flow method
  • Auto-oxidation rate
  • Laser flash photolysis
  • Redox potentials
  • NO complexes
  • Acknowledgements
  • References
  • Supplementary material