Báo cáo khoa học: a-Conotoxin GI benzoylphenylalanine derivatives 1 H-NMR structures and photoaffinity labeling of the Torpedo californicanicotinic acetylcholine receptor

Tác giả: Igor E. Kasheverov, David C. Chiara, Maxim N. Zhmak, Innokenty V. Maslennikov, Vladimir S. Pashkov, Alexander S. Arseniev, Yuri N. Utkin, Jonathan B. Cohen, and Victor I. Tsetlin

Lĩnh vực: Hóa sinh, Dược học

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này tập trung vào việc tổng hợp và đặc tính hóa các dẫn xuất a-conotoxin GI có khả năng quang hoạt hóa, cụ thể là các hợp chất GI(Bpa4) và GI(Bpa12), được thiết kế để nghiên cứu tương tác với thụ thể nicotinic acetylcholine (nAChR). Sử dụng kỹ thuật phổ cộng hưởng từ hạt nhân (NMR) và gắn nhãn quang ái lực, các nhà khoa học đã xác định cấu trúc 3D của các dẫn xuất này và làm sáng tỏ các vùng trên thụ thể nAChR mà chúng gắn kết. Kết quả cho thấy GI(Bpa12) có ái lực cao với thụ thể, liên kết với hai vị trí và có khả năng quang nhãn các tiểu đơn vị α, γ và δ. Nghiên cứu cũng xác định các đoạn tiểu đơn vị cụ thể của nAChR bị gắn nhãn, cung cấp thông tin chi tiết về vị trí gắn kết của a-conotoxin.

Mục lục chi tiết:

• Keywords
• Correspondence
• Abstract
• Abbreviations
• Introduction
• Results
• Synthesis and characterization of the a-conotoxin GI Bpa analogs
• Structures of Bpa analogs of Gl
• Preparation of 125I-labeled GI(Bpa12) and optimization of photolabeling conditions
• Identification of nAChR subunit fragments photolabeled by 125I2-GI(Bpa12)
• Discussion
• Experimental procedures
• Materials
• Synthesis of Bpa analogs of a-conotoxin Gl
• NMR spectroscopy and experimental data processing
• Homology modeling
• Preparation of radiolabeled ligands
• Radioligand assays
• Optimization of photolabeling conditions
• Preparative photolabeling of nAChR-rich membranes with iodinated GI(Bpa12) derivatives
• Enzymatic digests
• Sequence analysis
• Acknowledgements
• References