Báo cáo khoa học: Evidence for noncooperative metal binding to the a domain of human metallothionein

Tác giả: Kelly E. Rigby Duncan and Martin J. Stillman

Lĩnh vực: Department of Chemistry, The University of Western Ontario, London, ON, Canada

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này điều tra phản ứng gắn kim loại của miền α biệt lập của isoforme metallothionein người 1a, tập trung vào việc làm rõ tính chất hợp tác của cơ chế gắn kim loại. Phản ứng kim loại hóa của miền α đã được chứng minh một cách rõ ràng là diễn ra theo một cơ chế không hợp tác ở pH sinh lý, sử dụng phổ hấp thụ CD và UV, cùng với phổ khối ESI. Dữ liệu cho thấy sự hiện diện của các dạng trung gian gắn kim loại một phần dưới điều kiện Cd²⁺ giới hạn. Việc chuẩn độ với bốn đương lượng mol Cd²⁺ là cần thiết để hình thành hoàn toàn dạng Cd4α. Cơ chế gắn kim loại không hợp tác này ngụ ý rằng các dạng trung gian gắn kim loại một phần và dạng tự do kim loại là các trạng thái ổn định, có thể đóng vai trò trong chức năng chưa được xác định của metallothionein.

Mục lục chi tiết:

• Introduction
• Keywords
• Correspondence
• Abstract
• Abbreviations
• Evidence for noncooperative metal binding to the α domain of human metallothionein
• Results
• Discussion
• Experimental procedures
• Materials
• Protein preparation
• Further protein preparation for metal-binding studies
• Metallation of apo-a-rhMT with Cd2+ at pH 7
• CD/UV absorption spectroscopy
• Analytical and spectroscopic measurements
• MS
• Acknowledgements
• References