Báo cáo khoa học: Staphylococcal enterotoxin C1-induced pyrogenic cytokine production in human peripheral blood mononuclear cells is mediated by NADPH oxidase and nuclear factor-kappa B

Staphylococcal enterotoxin C1-induced pyrogenic cytokine production in human peripheral blood mononuclear cells is mediated by NADPH oxidase and nuclear factor-kappa B

Tác giả: Chun-Li Su, Chun-Chun Cheng, Mao-Tsun Lin, Hsiao-Chun Yeh, Meng-Chou Lee, Jenq-Chang Lee and Shen-Jeu Won

Lĩnh vực: Vi sinh và Miễn dịch học

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này tập trung vào việc tìm hiểu vai trò của NADPH oxidase và yếu tố hạt nhân kappa B (NF-κB) trong phản ứng sản sinh cytokine gây sốt, do enterotoxin C1 của tụ cầu (SEC1) gây ra, tại các tế bào đơn nhân máu ngoại vi của người (PBMC). Kết quả cho thấy phản ứng sốt ở thỏ, sau khi tiếp xúc với dịch nổi từ PBMC được kích thích bởi SEC1, tương ứng với nồng độ interleukin-1β và interleukin-6 trong dịch nổi. Sự giải phóng các cytokine này, sự di chuyển của NF-κB vào nhân và hoạt động gắn kết DNA của nó diễn ra theo thời gian và có thể bị loại bỏ hoàn toàn bởi các chất ức chế NF-κB. Tương tự, sự giải phóng các loại oxy phản ứng (ROS) và sự di chuyển của tiểu đơn vị p47phox của NADPH oxidase vào màng tế bào cũng diễn ra theo thời gian. Việc sử dụng apocynin, một chất ức chế NADPH oxidase, đã làm giảm phản ứng sốt ở thỏ, giảm sự di chuyển của p47phox và hoạt động NF-κB trong PBMC, đồng thời ức chế ROS và sản xuất cytokine gây sốt. Các phát hiện này cho thấy SEC1 có thể hoạt động thông qua cơ chế NADPH oxidase để tạo ra ROS, từ đó kích hoạt NF-κB trong PBMC, thúc đẩy quá trình tổng hợp cytokine gây sốt và dẫn đến phản ứng sốt ở thỏ.

Mục lục chi tiết:

• Giới thiệu
• Kết quả
• Thảo luận
• Quy trình thực nghiệm
• Chuẩn bị PBMC
• Chuẩn bị dịch chiết tế bào toàn phần và phân đoạn nhân
• Chuẩn bị phân đoạn tế bào chất và màng
• Miễn dịch làm mờ
• Phân tích dịch tiết cytokine
• Phân tích điện di chuyển bằng gel (EMSA)
• Xác định ROS
• Phân tích thống kê
• Tài liệu tham khảo