Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 10 trang
Dung lượng: 168 KB

Giới thiệu nội dung

Complete Reconstitution of an ATP-Binding Cassette Transporter LolCDE Complex from Separately Isolated Subunits

Tên đề tài: Complete Reconstitution of an ATP-Binding Cassette Transporter LolCDE Complex from Separately Isolated Subunits

Tác giả: Kyoko Kanamaru, Naohiro Taniguchi, Shigehiko Miyamoto, Shin-ichiro Narita, and Hajime Tokuda

Lĩnh vực: Sinh học phân tử, Hóa sinh

Nội dung tài liệu:

Nghiên cứu này trình bày phương pháp tái tổ hợp hoàn chỉnh phức hợp LolCDE, một thành phần của hệ thống ABC transporter, từ các đơn vị riêng lẻ. Phức hợp LolCDE đóng vai trò thiết yếu trong việc tách các lipoprotein khỏi màng trong, khởi đầu quá trình phân loại lipoprotein đến màng ngoài của vi khuẩn Escherichia coli. Các nhà nghiên cứu đã xác định các điều kiện tối ưu để tái tổ hợp phức hợp này, nhấn mạnh vai trò của phospholipid trong việc ổn định và tái cấu trúc các đơn vị chức năng. Đáng chú ý, hoạt tính giải phóng lipoprotein đã được tái tạo ngay cả khi thiếu đơn vị LolC, cho thấy vai trò cốt lõi của LolD và LolE trong cơ chế này. Kết quả nghiên cứu cung cấp cái nhìn sâu sắc về cơ chế hoạt động của các ABC transporter liên quan đến việc vận chuyển lipoprotein.

Mục lục chi tiết:

  • Keywords
  • Abstract
  • Introduction
  • Results
    • ATPase activities of LolCDE and LolD
    • Inactivation and reactivation of the ATPase activity of LolCDE
    • Protection of LolD by membrane subunits
    • Reconstitution of the functional lipoprotein-releasing machinery from subunits
    • Assembly of the LolCDE complex from separately isolated subunits
  • Discussion
  • Experimental procedures
    • Materials
    • Overproduction of Lol proteins
    • Construction of plasmids
    • Isolation of Lol proteins
    • ATPase activity
    • Page
    • Reconstitution of the LolCDE complex from its subunits
    • In vitro assembly of Lol subunits
  • Acknowledgements
  • References