Báo cáo khoa học: Cyclosporin A-induced oxidative stress is not the consequence of an increase in mitochondrial membrane potential

Cyclosporin A-induced oxidative stress is not the consequence of an increase in mitochondrial membrane potential

Tác giả: Marco van der Toorn, Henk F. Kauffman, Margaretha van der Deen, Dirk-Jan Slebos, Gerard H. Koëter, Rijk O. B. Gans, Stephan J. L. Bakker

Lĩnh vực: Y học, Sinh hóa

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này điều tra liệu cyclosporin A (CsA) gây ra stress oxy hóa thông qua việc tăng điện thế màng ty thể (ΔΨm) và sản xuất các loài oxy phản ứng (ROS). Các thí nghiệm được thực hiện trên tế bào thận người (HK-2) và tế bào ung thư phổi nhỏ ở người (GLC4), cũng như trên ty thể cô lập từ gan lợn. Kết quả cho thấy CsA làm tăng ROS và canxi nội bào (Ca2+), nhưng không làm tăng ΔΨm. Tác dụng này không do ức chế calcineurin hoặc hoạt động của P-glycoprotein. Nghiên cứu cũng chỉ ra rằng ty thể không phải là nguồn gốc của ROS tăng lên do CsA, và việc sử dụng các đầu dò huỳnh quang có thể bị ảnh hưởng bởi P-glycoprotein, dẫn đến kết quả sai lệch.

Mục lục chi tiết:

• Cyclosporin A-induced oxidative stress
• Immunosuppressive treatment with cyclosporin A (CsA)
• Mitochondria represent a major source of intracellular ROS
• One mechanism by which the mitochondrial membrane potential (ΔΨm) can decrease
• Results
• Closure of the MPTP and ΔΨm
• Effect of CsA and its analogs on mitochondrial function
• Isolated mitochondria
• Discussion
• Acknowledgements
• References
• Experimental procedures
• Chemicals
• Cell culture
• Immunocytochemical staining of P-glycoprotein
• Flow cytometry analyses
• Isolation of mitochondria from pig liver
• Mitochondrial swelling assay
• ΔΨm in isolated mitochondria
• Luminescence monitoring of mitochondrial ATP
• Mitochondrial respirometry
• Mitochondrial ROS production
• Statistical analysis