Báo cáo khoa học: CYP7B1-mediated metabolism of dehydroepiandrosterone and 5a-androstane-3b,17b-diol – potential role(s) for estrogen signaling

CYP7B1-MEDIATED METABOLISM OF DEHYDROEPIANDROSTERONE AND 5α-ANDROSTANE-3β,17β-DIOL – POTENTIAL ROLE(S) FOR ESTROGEN SIGNALING

Tác giả: Hanna Pettersson, Lisa Holmberg, Magnus Axelson, Maria Norlin

Lĩnh vực: Hóa sinh, Dược học

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này tập trung vào quá trình chuyển hóa các steroid bởi enzyme CYP7B1, đặc biệt là dehydroepiandrosterone (DHEA) và 5α-androstane-3β,17β-diol (3β-Adiol). Enzyme CYP7B1, thuộc họ cytochrome P450, đóng vai trò quan trọng trong việc chuyển hóa nhiều steroid liên quan đến tín hiệu hormone. Nghiên cứu này đã điều tra các phản ứng hydroxyl hóa DHEA và 3β-Adiol bởi CYP7B1 trong các vi thể gan lợn và tế bào thận người. Kết quả cho thấy hiệu quả chuyển hóa của hai chất nền này tương tự nhau, với tỷ lệ Kcat/Km trong cùng bậc độ lớn. Tuy nhiên, tỷ lệ DHEA/3β-Adiol cao, tương tự như trong nhiều mô người, đã mạnh mẽ ức chế quá trình chuyển hóa 3β-Adiol bởi CYP7B1. Điều này gợi ý rằng nồng độ steroid tại các mô cụ thể có thể ảnh hưởng đáng kể đến hoạt động xúc tác của CYP7B1 và do đó ảnh hưởng đến mức độ của các steroid liên quan đến CYP7B1 có thể tác động đến tín hiệu thụ thể estrogen β (ERβ). Nghiên cứu cũng so sánh khả năng hoạt hóa ERβ của 3β-Adiol và 7α-hydroxy-DHEA, cho thấy 3β-Adiol là chất hoạt hóa hiệu quả hơn.

Mục lục chi tiết:

• Keywords
• Correspondence
• CYP7B1, a cytochrome P450 enzyme…
• The steroid hydroxylase CYP7B1…
• Abbreviations
• Results
• Tissue- and age-specific differences in porcine CYP7B1-mediated hydroxylase activities towards DHEA and 3ẞ-Adiol
• CYP7B1-mediated activities towards DHEA and 3ẞ-Adiol in different sexes
• Kinetic analysis of CYP7B1-mediated metabolism of DHEA and 3ẞ-Adiol
• CYP7B1-mediated activities towards DHEA and 3ẞ-Adiol in human kidney (HEK293) cells
• Effects of 3ẞ-Adiol on CYP7B1-mediated hydroxylation of DHEA
• Effects of DHEA on CYP7B1-mediated 3ẞ-Adiol hydroxylation
• Analysis of ERẞ activation by 3ẞ-Adiol and 7a-hydroxy-DHEA
• Discussion
• Experimental procedures
• Materials
• Animals and tissue sample collection
• Microsomal preparation
• Preparation of 3ẞ-Adiol
• Incubations with microsomes
• Cultures of HEK293 cells
• Overexpression of recombinant human CYP7B1 in HEK293 cells
• Analysis of incubations with DHEA
• HPLC analysis of incubations with 3ẞ-Adiol
• GC/MS: identification of 3ẞ-Adiol metabolites
• Analysis of ERẞ activation by ERE-reporter luciferase assay
• Statistical analysis
• Acknowledgements
• References
• Supplementary material