Báo cáo khoa học: Vanadium-induced apoptosis of HaCaT cells is mediated by c-fos and involves nuclear accumulation of clusterin

Vanadium-induced apoptosis of HaCaT cells is mediated by c-fos and involves nuclear accumulation of clusterin

Tác giả: Soultana Markopoulou, Evangelos Kontargiris, Christina Batsi, Theodore Tzavaras, Ioannis Trougakos, David A. Boothman, Efstathios S. Gonos, Evangelos Kolettas

Lĩnh vực: Sinh học tế bào, Hóa sinh, Dược học

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này khám phá cơ chế gây ra hiện tượng chết tế bào theo chương trình (apoptosis) trong các tế bào biểu bì người (HaCaT) do hợp chất vanadyl(IV) sulfate (VOSO₄) gây ra. Kết quả cho thấy VOSO₄ ức chế sự tăng trưởng tế bào và kích hoạt con đường apoptosis. Quá trình này liên quan đến việc tăng cường biểu hiện của protein c-fos, thay đổi trong biểu hiện của clusterin (CLU), và sự mất cân bằng giữa các protein thuộc họ Bcl-2 có khả năng chống apoptosis và thúc đẩy apoptosis. Đặc biệt, sự biểu hiện quá mức của c-fos dẫn đến sự giảm biểu hiện của CLU dạng tiết và tăng biểu hiện của CLU dạng nhân, một protein thúc đẩy quá trình chết tế bào. Nghiên cứu cũng chỉ ra rằng việc tăng cường biểu hiện của Bcl-2 có thể bảo vệ tế bào khỏi apoptosis do VOSO₄ gây ra, trong khi đó, sự biểu hiện quá mức của CLU dạng nhân lại làm tăng nhạy cảm của tế bào với apoptosis.

Mục lục chi tiết:

• Keywords
• Correspondence
• Introduction
• Abbreviations
• Results:
• VOSO4 inhibited cell proliferation of HaCaT cells by affecting the expression of cell cycle regulatory proteins
• VOSO4 induced apoptosis of HaCaT cells
• Induction of apoptosis correlated with upregulation of the c-fos proto-oncogene and changes in the expression of CLU
• Ectopic overexpression of c-fos oncoprotein promoted the induction of nCLU and apoptosis in HaCaT cells
• Differential effects of constitutive expression of sCLU and Bcl-2 on vanadium-induced apoptosis
• Overexpression of nCLU (C120) sensitized HaCaT cells to apoptosis
• Discussion
• Experimental procedures
• Cell culture
• Retroviral vectors and retroviral HaCaT cell infections
• Generation of the nCLU (C120) plasmid and nCLU (C120)-expressing HaCaT cells
• Treatment of HaCaT cells with VOSO4
• DNA fragmentation assay
• Preparation of cytoplasmic and nuclear extracts
• Extraction of total proteins from isolated nuclei
• Western blot analysis
• Isolation of total RNA and RT-PCR and northern blot hybridization analysis
• Acknowledgements
• References
• Supporting information