BƢỚC ĐẦU KHẢO SÁT QUÁ TRÌNH PHÁT SINH BỆNH CỦA VIRUS ĐỐM TRẮNG TRÊN TÔM SÖ (Penaeus monodon) BẰNG MÔ HÌNH GÂY NHIỄM THỰC NGHIỆM CHUẨN VÀ PHƢƠNG PHÁP HÓA MÔ MIỄN DỊCH

BƯỚC ĐẦU KHẢO SÁT QUÁ TRÌNH PHÁT SINH BỆNH CỦA VIRUS ĐỐM TRẮNG TRÊN TÔM SÚ (Penaeus monodon) BẰNG MÔ HÌNH GÂY NHIỄM THỰC NGHIỆM CHUẨN VÀ PHƯƠNG PHÁP HÓA MÔ MIỄN DỊCH

Tác giả: PHẠM MINH NHỰT

Lĩnh vực: CÔNG NGHỆ SINH HỌC

Nội dung tài liệu:

Luận văn này tập trung khảo sát bước đầu về quá trình phát sinh bệnh của virus đốm trắng (WSSV) trên tôm sú (Penaeus monodon). Bệnh đốm trắng là một bệnh truyền nhiễm nguy hiểm, gây thiệt hại lớn cho ngành nuôi tôm trên toàn cầu. Nghiên cứu sử dụng mô hình gây nhiễm thực nghiệm chuẩn kết hợp với phương pháp hóa mô miễn dịch để xác định vị trí xâm nhập đầu tiên của virus, phân tích quá trình xâm nhiễm và tìm hiểu nguyên nhân gây chết trên tôm. Thí nghiệm được thực hiện bằng cách gây nhiễm cho tôm với các liều virus khác nhau, sau đó thu mẫu theo từng thời điểm để khảo sát sự phát sinh bệnh bằng phương pháp hóa mô miễn dịch. Kết quả nghiên cứu cung cấp thông tin quan trọng về quá trình diễn biến của bệnh, là nền tảng cho việc phát triển các biện pháp kiểm soát hiệu quả.

Mục lục chi tiết:

• Trang tựa
• Lời cảm ơn
• Tóm tắt
• Mục lục
• Danh sách các chữ viết tắt
• Danh sách các hình
• Danh sách các bảng
• Phần I: Giới thiệu
• 1.1. Đặt vấn đề
• 1.2. Mục đích
• 1.3. Yêu cầu
• Phần II: Tổng quan tài liệu
• 2.1. Đặc điểm sinh học của hệ miễn dịch tôm sú
• 2.1.1. Cơ chế phòng vệ chung của giáp xác
• 2.1.2. Các tế bào máu tham gia vào đáp ứng miễn dịch của giáp xác
• 2.1.3. Hệ thống prophenoloxidase (proPO)
• 2.1.4. Hệ thống đông máu
• 2.1.5. Các chất ức chế proteinase
• 2.1.6. Hệ thống nhận diện không chuyên biệt
• 2.1.7. Các peptide kháng khuẩn
• 2.2. Bệnh đốm trắng và virus gây bệnh đốm trắng
• 2.2.1. Bệnh đốm trắng
• 2.2.1.1. Lịch sử và phân bố
• 2.2.1.2. Triệu chứng, bệnh tích
• 2.2.2. Virus đốm trắng
• 2.2.2.1. Phân loại và tên gọi
• 2.2.2.2. Hình thái
• 2.2.2.3. Cấu trúc
• 2.3. Quá trình phát sinh bệnh của virus đốm trắng
• 2.3.1. Vật liệu gây bệnh
• 2.3.2. Cơ chế gây bệnh
• 2.3.3. Cơ chế lây lan
• 2.4. Mô hình cảm nhiễm chuẩn virus trên tôm
• 2.5. Phương pháp hóa mô miễn dịch
• 2.5.1. Nguyên lý
• 2.5.2. Kháng nguyên
• 2.5.3. Kháng thể
• 2.5.4. Phương pháp nhuộm
• 2.5.4.1. Phương pháp trực tiếp
• 2.5.4.2. Phương pháp gián tiếp
• 2.5.4.3. Phương pháp PAP (peroxidase anti – peroxidase method)
• 2.5.4.4. Phương pháp avidin – biotin complex (ABC method)
• 2.5.4.5. Phương pháp đánh dấu Streptavidin Biotin (LASB)
• Phần III: Vật liệu – Phương pháp
• 3.1. Thời gian và địa điểm
• 3.1.1. Thời gian
• 3.1.2. Địa điểm
• 3.2. Vật liệu
• 3.2.1. Vật liệu và dụng cụ sử dụng trong quá trình gây nhiễm thực nghiệm
• 3.2.1.1. Vật liệu
• 3.2.1.2. Dụng cụ
• 3.2.2. Các hóa chất và dụng cụ sử dụng trong IHC
• 3.2.2.1. Hóa chất
• 3.2.2.2. Vật tư
• 3.2.2.3. Thiết bị
• 3.3. Bố trí thí nghiệm
• 3.3.1. Tôm và điều kiện thí nghiệm
• 3.3.2. Virus đốm trắng dòng Việt Nam (WSSV-VN)
• 3.3.3. Gây nhiễm virus đốm trắng trên tôm sú
• 3.3.4. Thời gian theo dõi và thu mẫu để khảo sát quá trình phát sinh bệnh
• 3.4. Phương pháp nghiên cứu
• 3.4.1. Phương pháp pha loãng dịch virus
• 3.4.2. Phương pháp thu mẫu tôm
• 3.4.3. Phương pháp nhuộm IHC
• 3.4.4. Xử lý thống kê
• Phần IV: Kết quả và thảo luận
• 4.1. Độc lực của virus gốc dòng Việt Nam (WSSV-VN)
• 4.1.1. Các dấu hiệu lâm sàng và tỷ lệ gây chết
• 4.1.2. Tỷ lệ nhiễm của tôm thí nghiệm theo từng thời điểm
• 4.2. Khảo sát quá trình phát sinh bệnh của virus đốm trắng dòng Việt Nam trên tôm sú
• 4.2.1. Quá trình phát sinh bệnh của WSSV-VN trên tôm sú ở liều gây nhiễm thấp (10^1.5 SID₅₀/ml)
• 4.2.2. Quá trình phát sinh bệnh của WSSV-VN trên tôm sú ở liều cao (10^4.0 SID₅₀/ml)
• 4.2.3. So sánh giữa hai liều gây nhiễm về quá trình phát sinh bệnh
• 4.3. Thảo luận
• Phần V: Kết luận và đề nghị
• 5.1. Kết luận
• 5.2. Đề nghị
• Tài liệu tham khảo
• Phụ lục