Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 26 trang
Dung lượng: 601 KB

Giới thiệu nội dung


ĐÁNH GIÁ HIỆU QUẢ CHỐNG LÃO HÓA DA CỦA ASTAXANTHIN CHIẾT XUẤT TỪ TẢO HAEMATOCOCCUS PLUVIALIS TRÊN MÔ HÌNH CHUỘT

Tác giả: Tô Minh Quân

Lĩnh vực: Công nghệ sinh học

Nội dung tài liệu:

Nghiên cứu này tập trung đánh giá hiệu quả chống lão hóa da của astaxanthin (AST) chiết xuất từ tảo Haematococcus pluvialis trên mô hình chuột. Astaxanthin, một hợp chất carotenoid có hoạt tính chống oxy hóa mạnh mẽ, được xác định có khả năng trung hòa các gốc oxy hóa hoạt động (ROS) – tác nhân chính gây lão hóa da. Luận án đề cập đến các phương pháp thu nhận và định lượng AST, cũng như các thử nghiệm in vitro và in vivo nhằm đánh giá khả năng bảo vệ tế bào da khỏi tác động của tia UV và các yếu tố gây lão hóa khác, đồng thời xem xét hiệu quả trên mô hình chuột. Các phương pháp nghiên cứu bao gồm nuôi cấy và cảm ứng tảo tổng hợp AST, tách chiết và định lượng AST, đánh giá độc tính, khả năng tăng sinh, di cư và bảo vệ tế bào da khỏi lão hóa do hydrogen peroxide (H2O2), cũng như đánh giá biểu hiện gen và protein liên quan đến lão hóa da. Cuối cùng, nghiên cứu khảo sát tác động của AST trên da chuột khi tiếp xúc với tia UVB.

Mục lục chi tiết:

  • MỞ ĐẦU
  • TỔNG QUAN
    • Tổng quan về vi tảo H. pluvialis
    • Giới thiệu về AST
    • Nguồn thu nhận AST
    • Cơ chế chống lão hóa của AST
    • Cấu trúc da
    • Lão hóa da
    • Lão hoá tế bào
  • VẬT LIỆU – PHƯƠNG PHÁP
    • Thiết kế thí nghiệm: phương pháp thực nghiệm mô tả.
    • Mẫu vật tươi
    • Hóa chất
    • Sơ đồ thí nghiệm tổng quát
    • Phương pháp nghiên cứu
      • Thiết kế hệ thống nuôi tảo
      • Phương pháp nuôi tảo trong chai nuôi 1000 ml
      • Phương pháp cảm ứng tảo HP-C tổng hợp AST bằng cường độ ánh sáng mạnh
      • Phương pháp thu nhận dịch chiết AST
      • Phương pháp định lượng AST
      • Phương pháp thu nhận dịch chiết tảo H. pluvialis giàu AST (AST-EX)
      • Phương pháp FRAP
      • Phương pháp ABTS
      • Phương pháp đánh giá độc tính của AST-EX trên nguyên bào sợi
      • Phương pháp đánh giá sự tăng sinh của nguyên bào sợi trong môi trường AST-EX
      • Phương pháp đánh giá sự di cư tế bào theo phương pháp Scratch-wound assay
      • Phương pháp MTT để đánh giá sức sống tế bào
      • Phương pháp tạo mô hình lão hoá bằng hydrogen peroxide (H2O2)
      • Phương pháp nhuộm senescence- associated ß-galactosidase
      • Phương pháp đánh giá khả năng của AST-EX trong việc bảo vệ tế bào trước yếu tố gây lão hoá H2O2
      • Phương pháp nhuộm Hoestch và phalloidin để đánh giá hình dạng tế bào
      • Phương pháp đánh giá sự biểu hiện mRNA tế bào bằng phương pháp realtime PCR
      • Phương pháp WESTERN BLOT đánh giá sự biểu hiện CDK4, CDK6 và cyclin D1
      • Phương pháp tạo mô hình chuột lão hóa da (In vivo)
      • Phương pháp đánh giá khả năng bảo vệ da chuột khỏi tia UVB
  • KẾT QUẢ BIỆN LUẬN
    • Nuôi cấy tăng sinh H. pluvialis và cảm ứng AST