Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 8 trang
Dung lượng: 165 KB

Giới thiệu nội dung

DNA Supercoiling in Escherichia coli is Under Tight and Subtle Homeostatic Control, Involving Gene-Expression and Metabolic Regulation of Both Topoisomerase I and DNA Gyrase

Tác giả: Jacky L. Snoep, Coen C. van der Weijden, Heidi W. Andersen, Hans V. Westerhoff, and Peter Ruhdal Jensen

Lĩnh vực: Sinh học phân tử, Sinh hóa học

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này khám phá cơ chế điều hòa chặt chẽ và tinh tế của quá trình siêu xoắn DNA trong vi khuẩn Escherichia coli. Các tác giả đã phát triển một phương pháp mới để định lượng mức độ kiểm soát cân bằng nội môi của trạng thái siêu xoắn DNA trong điều kiện in vivo. Nghiên cứu tập trung vào việc điều chỉnh biểu hiện của enzyme topoisomerase I và DNA gyrase, đo lường ảnh hưởng lên siêu xoắn DNA và biểu hiện của các enzyme này. Kết quả cho thấy cơ chế điều hòa cân bằng nội môi của siêu xoắn DNA trong E. coli gần như hoàn chỉnh và diễn ra một cách tinh tế, liên quan đến ít nhất ba con đường điều hòa khác nhau. Phân tích chi tiết chỉ ra rằng 72% sự cân bằng nội môi là do điều hòa ở cấp độ hoạt động enzyme và 28% còn lại là do điều hòa ở cấp độ biểu hiện gen, trong đó biểu hiện của DNA gyrase đóng vai trò quan trọng hơn.

Mục lục chi tiết:

  • Giới thiệu
  • Vật liệu và Phương pháp
  • Thành phần vi khuẩn
  • Nuôi cấy
  • Enzyme
  • Chiết xuất Plasmid và ATP, ADP
  • Phân tích ATP/ADP
  • Phân tích siêu xoắn
  • Nồng độ Topoisomerase
  • Xây dựng plasmid sử dụng cho sự tích hợp tại locus topA pHA2
  • PHA5
  • PTOPA2TS
  • PTOPA2A5TS
  • Thay thế promoter topA nhiễm sắc thể bằng promoter cảm ứng kiểu lac và gen lacIq1
  • Kết quả
  • Điều biến biểu hiện topoisomerase I bởi IPTG
  • Siêu xoắn DNA có dễ dàng bị ảnh hưởng bởi topoisomerase I không?
  • Kiểm soát của DNA gyrase phụ thuộc vào siêu xoắn đối với biểu hiện gen
  • Cân bằng nội môi của tốc độ tăng trưởng
  • Cân bằng nội môi thông qua biểu hiện gen DNA gyrase phụ thuộc vào siêu xoắn
  • Cân bằng nội môi thông qua biểu hiện topoisomerase I phụ thuộc vào siêu xoắn?
  • Thảo luận
  • Kiểm soát cân bằng nội môi của DNA siêu xoắn ở sinh vật nhân sơ
  • Tài liệu tham khảo